Словарь микробиологии - фаготипирование

способ определения принадлежности выделенной и идентифицированной до вида к-ры к тому или иному фаговару (см.). Используют 2 подхода. Сущность первого состоит в установлении св-в, полученных из лизогенной к-ры фагов (литического спектра, антигенной специфичности и др.). Сущность второго, более распространенного, подхода базируется на выявлении спектра чувствительности выделенной к-ры к набору стандартных типовых фагов.

Используют для выяснения активности фагоцитарной реакции в целом и функционирования отдельных этапов Ф.р. (хемотаксиса, опсонизации, прикрепления, захвата, умерщвления, переваривания). Для оценки фагоцитарной активности обычно применяют: 1) фагоцитарный индекс Гамбургера (ФИ) процент фагоцитов, принимающих участие в фагоцитозе; 2) фагоцитарное число Райта (ФЧ) среднее число захваченных одним фагоцитом частиц; 3) показатель фагоцитарной способности крови индивида (ПФС) произведения ФИ и ФЧ на число лейкоцитов или моноцитов в 1 мкм крови; 4) показатель завершенности фагоцитоза; 5) др.

Лучше брать живые к-ры стандартных штаммов золотистого и белого стафилококка и кишечной палочки, поскольку они позволяют выявить важнейший показатель фагоцитозаего завершенность. Для опыта необходимы отмытые от среды суточные агаровые к-ры плотностью 0,2 2 млрд м.т./мл при исследовании фагоцитарной активности полинуклеаров и 10 млн м.

Соотношение рекомендуют от 1:1 до 1:100, экспозицию от 5 мин до 3 ч. Для постановки Ф.р. с цельной кровью взятую из пальца в стерильные пробирки с гепарином кровь разводят р-ром Хенкса (1:20), центрифугируют 5 мин при 800 g, над осадок сливают, осадок р-ром Хенкса разбавляют до прежнего объема. В нескольких пробирках готовят смеси из 0,5 мл суспензии лейкоцитов и 0,5 мл отмытых от среды суспензии микроорганизмов в р-ре Хенкса плотностью 100 млн м.

т./мл. Смесь инкубируют при 37°С и через 15, 30, 45 мин одну из пробирок центрифугируют 5 мин при 800 g, из осадка готовят мазки, фиксируют их смесью Никифорова и окрашивают водным раствором метиленового синего или по Романовскому -Гимзе. Подсчитывают ФИ и ФЧ, а исходя из этих данных и количества лейкоцитов в 1 мкл ПФС. Важно найти также скорость Ф.