Словарь микробиологии - лизоцима определения.

с-ки и 2 мл взвеси (на таком же фосфатном буфере) суточной агаровой к-ры микрококка плотностью 0,66 (по левому барабану ФЭК-М). Смесь инкубируют при 37 °С в течение 30 мин и плотность ее замеряют на ФЭК-М по правому барабану с зеленым светофильтром. Показатель барабана сравнивают с калибровочной кривой. Активность Л. выражают в мкг/мл (методика О.

В. Бухарина, 1971). Методика, разработанная Л.П. Титовым (1978), пригодна для определения содержания Л. в любых биол. жидкостях. Однако для регистрации результатов необходим спектрофотометр (СФМ) с термостатирующей камерой и записывающим устройством. В кювету СФМ 10x10 мм объемом 3 мл последовательно вносят 1,5 мл 0,05% взвеси ацетонового порошка микрококка, приготовленного на 1/15 М фосфатном буфере, 0,5 мл 0,3 М р-ра натрия хлорида и 0,5 мл цельной либо разведенной с-ки или др.

иссл. жидкости. Содержимое кюветы перемешивают тефлоновой палочкой, ставят в термостатирующее устройство подготовленного к работе СФМ и на 90-120 с включают его записывающее устройство. Находят тангенс угла наклона кинетической кривой и по калибровочному графику устанавливают активность Л. в мкг/мл. Поскольку активность Л. в разных субстратах неодинакова, в предварительном опыте следует подобрать соотношения между концентрацией субстрата и фермента.